ПРИМЕНЕНИЕ ФИЛЬТРОВ ПРОИЗВОДСТВА ООО «СИБИРЬ-ЦЕО» ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ЭМ-ПРЕПАРАТА ИЗ КОНЦЕНТРАТА «БАЙКАЛ ЭМ1»

В настоящее время во многих развитых странах разработаны и активно продвигаются на рынок технологии Эффективных Микроорганизмов(ЭМ-технологии), находящие применение в раз-личных сферах – растениеводстве, животноводстве, медицине и т.д. В России представлен препарат «Байкал ЭМ1», который в сочетании с питательной средой «ЭМ-патока» предназначен для создания оптимальных условий для развития полезной микрофлоры, приводящей к оздоровлению почвы, снижению токсических элементов, повышению ее плодородности и урожайности возделываемых культур, улучшению вкусовых качеств выращиваемой продукции и увеличению сроков хранения плодов в естественном виде [1].

Препарат «Байкал ЭМ1» представляет собой биомассу жизнеспособных почвенных микроорганизмов, которые для проявления активности нуждаются в создании определенных условий. Одним из наиболее важных факторов при этом является качество воды, т.к. она является средой, в которой растворяются питательные вещества и происходят различные химические реакции, позволяющие получать клетке необходимое питание, поскольку питательные вещества могут поступать в клетку только в виде раствора. С водой удаляются также продукты распада, образующиеся при обмене веществ, и в ней же могут содержаться вещества, тормозящие или полностью приостанавливающие развитие микроорганизмов, поскольку химически чистой воды в природе не существует – в ней всегда содержится то или иное количество разных примесей. Их действие на ферментативные реакции микроорганизмов достаточно значимо. Например, в воде могут содержаться трудно-растворимые соли магния, кальция, железа, алюминия, соли азотной кислоты, органические вещества, хлор, тяжелые металлы. Если данные вещества присутствуют в большом количестве, качество препарата «Байкал ЭМ1» значительно ухудшается, а значит и эффективность его действия тоже может снизиться. Поэтому не рекомендуется использовать при приготовлении ЭМ-препарата техническую воду и водопроводную воду, не отвечающую нормативным требованиям по содержанию хлора и других веществ. В этой связи, при приготовлении ЭМ-препарата, рекомендуется использование воды отстоянной или фильтрованной (последнее - предпочтительнее).

Исключительное значение имеет также биологический состав воды, применяемой для разведения концентрата «Байкал ЭМ1». В воде могут содержаться споровые палочки, разлагающие белки, флюоресцирующие бактерии, разлагающие жир, кишечная палочка, вызывающая запах, а также патогенные микроорганизмы и возбудители инфекций. Именно поэтому использование застоялой воды, грязной воды (или воды неизвестного качества) при приготовлении ЭМ-препарата также не рекомендуется.

Уникальность Компании АРГО заключается в том, что потребителям предлагается широкий спектр продукции различных фирм-изготовителей, и при этом разные виды продукции могут с ус-пехом дополнять друг друга. В частности, речь идёт о фильтрах серии «АРГО», которые изготавливает ООО «Сибирь-Цео», г.Новосибирск. Своим потребителям специалисты НПО «АРГО ЭМ-1» давно рекомендуют использовать для приготовления препарата воду, пропущенную через фильтры серии «АРГО». Сорбционные материалы: цеолит и активированный уголь, обработанный серебром в несмываемой форме, позволяют значительно снизить концентрацию остаточного хлора, неорганических примесей, органических соединений, нефтепродуктов, тяжелых металлов, радиоактивных элементов и сохранить при этом биологическую ценность воды, что особенно важно для раз-вития микроорганизмов.

Все эти качества воды были давно оценены потребителями продукции АРГО в том числе и при приготовлении препарата «Байкал ЭМ1», но теперь то, что было известно наверняка, подтверждено экспериментальными исследованиями, проведенными совместно ООО «Сибирь-Цео» и НПО «АРГО ЭМ-1» в Научном центре клинической и экспериментальной медицины СО РАМН г. Новосибирска [2].

Прежде всего, необходимо отметить, что различного рода химические анализы не дают полного представления о пригодности воды для выращивания эффективных микроорганизмов, т.к. она должна быть не только безвредной, но и, как уже отмечалось, активной в своем воздействии на клетки, повышая их жизнеспособность.

Оценить биологическую пригодность воды для выращивания эффективных микроорганизмов (когда, по существу, мы имеем дело с воздействиями, суммирующимися между собой по не-аддитивному принципу) можно по степени выраженности и особенностям ответа клеточных культур. В этом случае биологическая система (клетка) является индикатором такого сложного и не-прогнозируемого взаимодействия. Решить эту проблему в настоящее время какими-либо приборными методами не представляется возможным, поэтому применяются различные методы биологической индикации (далее - биоиндикации).
В последнее время появилось большое количество работ по биоиндикации на клеточном, тканевом, организменном, популяционном, биоценотическом уровнях [3, 4].

Определение: биоиндикация - это обнаружение биологически значимых антропогенных нагрузок на основе реакции на них живых организмов и их сообществ. Все это относится в полной мере ко всем видам антропогенных нагрузок: от экологических до фармакологических средств воздействия как на клетку, так и на человека в целом.

В настоящей статье приведены результаты исследований методом биоиндикации ЭМ-препарата (продукция ООО «ЭМ-центр», г.Улан-Удэ), приготовленного на разной воде, а именно:
1) дистиллированная вода;
2) водопроводная вода;
3) водопроводная вода, пропущенная через угольно-цеолитовый фильтр «Арго» производства ООО «Сибирь-Цео».

Цель работы: Провести исследования препарата «Байкал ЭМ1» и питательной среды «ЭМ-патока», разведенных на дистиллированной, водопроводной воде и воде, пропущенной через угольно-цеолитовый фильтр «Арго» и определить наиболее благоприятную воду для приготовления микробного симбиоза ЭМ-препарата. Исследования проводились на базе Лаборатории морфологии и клеточных культур ГУ Научный Центр Клинической и Экспериментальной Медицины СО РАМН, г.Новосибирск.

В процессе исследования изучались:
- активность препарата «Байкал ЭМ1» в сочетании с ЭМ-патокой при разведении его дистиллированной, водопроводной водой и водопроводной водой, пропущенной через угольно-цеолитовый фильтр «Арго»;
- воздействие на клеточную культуру НЕР-2 препарата «Байкал-ЭМ1».

С этой целью изучались активирующие свойства: плотность роста клеточной культуры (SP), митотическая активность клеточного монослоя (МА%), общий белок. Показатели SP и МА% изучались при временной экспозиции 48 и 72 ч. Актуальность проведенных исследований препарата «Байкал ЭМ1» на клеточных культурах НЕР-2 заключается в том, что данный препарат может быть с успехом использован не только для ускорения роста растений, созревания плодов, восстановления плодородия почвы и т.п., но и для повышения продуктивности молочных коров и привесов у поросят [5].
Исследования проводились на клеточной культуре HEP – 2, выращенной в пенициллиновых флаконах. На каждое исследование были взяты пробы исследуемого раствора ЭМ-препарата на дистиллированной, водопроводной воде и водопроводной воде, пропущенной через угольно-цеолитовый фильтр «Арго», - всего 4 пробы, включая контрольную культуру. Пробы водопроводной воды и воды, пропущенной через фильтр, отобраны из городской сети г.Новосибирска, Советский район.
Приготовление испытуемых растворов из препарата Байкал ЭМ-1 проводилось по следующей схеме:
Байкал ЭМ1 + ЭМ-патока разводились дистиллированной водой.
Байкал ЭМ1 + ЭМ-патока разводились водопроводной водой.
Байкал ЭМ1 + ЭМ-патока разводились водопроводной водой, пропущенной через угольно – цеолитовый фильтр «Арго».
Для приготовления раствора бралось 0,5 л исследуемой воды, 25 мл ЭМ-патоки и 5 мл препарата Байкал ЭМ1.

Приготовленные растворы использовались в экспериментах:
1. Исследование на клеточной культуре НЕР-2.
2. Исследование растворов без клеточной культуры, т.е. приготовление нативных мазков.


1. ИССЛЕДОВАНИЕ НА КЛЕТОЧНОЙ КУЛЬТУРЕ НЕР-2.

Методика исследований проб – стандартная. После формирования клеточного монослоя культуральная среда заменялась на питательную среду, содержащую тот или иной исследуемый раствор. Контролем служила клеточная культура без дополнения раствора. Клетки инкубировались в термостате при 37?С двое суток. Через 48 и 72 часа стекла с выросшими клетками извлекали, фиксировали, окрашивали по Романовскому и обсчитывали по сетке Стефанова под микроскопом. Для определения общего белка применялась методика по Нахласу.

Результаты исследований - приведены в таблице 1.

Выводы:

1. Для проб раствора, приготовленного на дистиллированной воде, по сравнению с контрольной культурой характерно:
- резкое угнетение роста клеточной культуры (SP) на всех временных интервалах в пределах 17 – 20%;
- уменьшение митотической активности клеточного монослоя (МА%) на всех временных интервалах в пределах 45 –50%;
- белок ниже на 25%.

2. Для проб раствора, приготовленного на водопроводной воде, по сравнению с контрольной культурой характерно:
- уменьшение роста клеточной культуры (SP) на всех временных интервалах в пределах 8 – 13%;
- уменьшение митотической активности клеточного монослоя (МА%) на всех временных интервалах в пределах 27 –40%;
- белок ниже на 11,6%.

3. Для проб раствора, приготовленного на воде после фильтра «Арго», характерно:
- увеличение роста клеточной культуры (SP) на всех временных интервалах в среднем на 9% по сравнению с контрольной культурой;
- митотическая активность клеточного монослоя (МА%) на всех временных интервалах ниже в пределах 10-20% по сравнению с контрольной культурой, но на 20 –30% выше по сравнению с пробами раствора, приготовленного на водопроводной воде;
- белок ниже на 6,4% по сравнению с контрольной культурой, но на 6% выше по сравнению с пробами раствора, приготовленного на водопроводной воде.

Таким образом, при внесении на клеточную культуру инактивированного препарата «Байкал ЭМ-1» установлено следующее:
- клеточная культура жизнеспособна при всех видах вод, но наилучшие результаты получены при добавлении исследуемого раствора, приготовленного на фильтрованной воде - наблюдается увеличение плотности роста, митотическая активность клеточного монослоя высокая (80 – 90% от контрольной культуры);
- в экспериментах на водопроводной и дистиллированной воде идет ухудшение роста клеток и падает значение митотической активности клеточного монослоя до 50-60%;
- для водопроводной и, в особенности, для дистиллированной воды, характерно снижение количества белка, что свидетельствует о снижении пролиферативной активности клеток, т.е. о снижении жизнеспособности клеточного монослоя. Использование угольно-цеолитового фильтра «Арго» для очистки питьевой воды показало, что общее количество белка существенно отличается от количества его, полученного при исследовании раствора на дистиллированной воде.

Таблица 1

Проба	Показатель	48 часов	72 часа	Белок, мг/л
Контрольная культура	Sp	51,5±0,3	72,2±0,4	42,2
	MA%	1,0	1,1
Раствор ЭМ-препарата на воде после фильтра «Арго»	Sp	56,2±0,5	78,5±0,9	39,5
	MA%	0,8	1,0
Раствор ЭМ-препарата на водопроводной воде	Sp	47,4±0,2	62,4±0,4	37,3
	MA%	0,6	0,8
Раствор ЭМ-препарата на дистиллированной воде	Sp	42,4±0,2	57,6±0,5	31,6
	MA%	0,5	0,6

2. ИССЛЕДОВАНИЯ НАТИВНЫХ МАЗКОВ С ПРЕПАРАТАМИ «БАЙКАЛ ЭМ1».


Методика исследований проб. Из приготовленных растворов (3 разных видов) взято по 4 мл в пенициллиновые флаконы со стеклами и поставлено в термостат на 48 и 72 ч. при температу-ре 37?С. Из каждого флакона через 72 часа сделаны нативные мазки и окрашены по Романовскому.

Методика исследований проб. Из приготовленных растворов (3 разных видов) взято по 4 мл в пенициллиновые флаконы со стеклами и поставлено в термостат на 48 и 72 ч. при температу-ре 37?С. Из каждого флакона через 72 часа сделаны нативные мазки и окрашены по Романовскому.

Результаты исследований.
1. При исследовании мазков из раствора, приготовленного на фильтрованной воде, обнаружено 3 вида живых бактерий (фото 1):
   ● крупные грамм положительные палочки, хорошо окрашенные в темно-синий цвет, собранные в колонии (бляшки) или длинной линией (отмечено их большое количество);
   ● мелкие тонкие загнутые палочки;
   ● совсем мелкие слабо окрашенные (их также большое количество).
Все поле роста (стекло) плотно усеяно бактериями.
 

Фото 1.
Препарат «Байкал ЭМ1», приготовленный на фильтрованной воде (увел. в 400 раз).

2. При исследовании мазков из раствора на водопроводной воде (фото 2)
   ● крупных бактерий не обнаружено, но достаточно много остальных бактерий.

Фото 2.
Препарат «Байкал ЭМ1», приготовленный на водопроводной воде (увел. в 400 раз).

3. При исследовании мазков из раствора на дистиллированной воде (фото 3)
   ● обнаружены редко выросшие бактерии те и другие (мелкие и еще более мелкие), иногда соединены на стекле «тяжами», но крупных бактерий – нет.

Фото 3.
Препарат «Байкал ЭМ1», приготовленный на дистиллированной воде (увел. в 400 раз).

Выводы:

Так как препарат «Байкал ЭМ1» должен содержать симбиоз бактерий, следовательно самый полный результат из трех видов бактерий (крупных – грамм положительных палочек, хорошо окрашенных по Романовскому, мелких и совсем мелких, покрывающих всю площадь стекла) получен в растворе на фильтрованной воде.

Таким образом, результаты проведенных исследований наглядно доказали необходимость использования фильтров серии «АРГО» не только для доочистки питьевой воды [6], но и при приготовлении препарата «Байкал ЭМ1», поэтому для тех, кто еще не пробовал совместно использовать разработки НПО «АРГО ЭМ-1» и ООО «Сибирь-Цео», советуем воспользоваться ими при подготовке к следующему дачному сезону.



Михайлова Л.П., д.м.н., вед.н.с., Игнатович Н.В., к.б.н., с.н.с., Ахроменко Е.С., н.с.
 Государственный научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, г. Новосибирск, Россия
 Тумашук В.В., региональный директор, Креккер Л.Г., к.т.н.
 Новосибирское региональное представительство НПО «АРГО ЭМ-1», г. Новосибирск, Россия
 Саломатин В.А., к.т.н., директор, Соболева Н.Ф., гл.технолог
 ООО «Сибирь – Цео», г. Новосибирск, Россия 
 

Список литературы


1. Каталог продукции Компании АРГО // Выпуск 22, часть 3 «Продукция оздоровительно-бытового назначения». – Новосибирск, 2005 г.

2. Протокол №01-6/201 исследований методом биоиндикации препарата «Байкал ЭМ1» и ЭМ-патоки на различных видах вод. ГУ Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, 21.06.2005.

3. Криволуцкий Д.А., Семашкин Г.М., Михальцева З.А., Турчанинова В.А. // Экология. – 1980. - № 1. – С. 120.

4. Тихомиров Ф.А., Розанов Б.Г. // Биологические науки. – 1983. - № 5. – С. 5-8.

5. ЭМ-технология. Здоровье человека. // Специальное предложение для консультантов Компании АРГО №5 – НПО «АРГО ЭМ-1».

6. Михайлова Л.П., Игнатович Н.В., Ахроменко Е.С., Саломатин В.А., Соболева Н.Ф. Исследование методом биоиндикации качества воды, пропущенной через фильтр серии «Арго» // Вестник АРГО №5 (05). – 2005. – С. 14-15